動(dòng)物性食品中硝基咪唑類藥物殘留量的測定 SPE-UPLC-MS/MS法

       硝基咪唑類藥物是畜禽飼料中常用的抗原蟲感染及抗菌藥，并有促進(jìn)生長的作用，但是該藥物及其某些代謝物對哺乳動(dòng)物具有致癌、致畸、致突變作用和遺傳毒性，飼料中硝基咪唑類藥物的不合理使用造成可食性動(dòng)物組織中藥物殘留，以至危害到人類食品安全。

       迪馬科技參考《GB 31658.23-2022食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 動(dòng)物性食品中硝基咪唑類藥物殘留量的測定》，建立了SPE-UPLC-MS/MS法，可測定豬肉、雞肉、豬肝中硝基咪唑類藥物，本方案使用乙酸乙酯提取，正己烷除脂，ProElut^® PXC凈化，Endeavorsil^® C18色譜柱分離檢測，定量限與標(biāo)準(zhǔn)方法一致，回收率在90%-110%之間。

      本方案完全重現(xiàn)了國標(biāo)方法，靈敏度高，回收率好，能滿足客戶需求。

一、適用范圍：

本方案適用于豬肉、雞肉、豬肝中甲硝唑、羥基甲硝唑、地美硝唑和羥基地美硝唑殘留量的測定。

二、標(biāo)準(zhǔn)品配制：

(1) 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：由迪馬科技標(biāo)準(zhǔn)品部提供，濃度100μg/mL，溶于甲醇。(cat.#: 47905)

(2) 混合標(biāo)準(zhǔn)工作液：吸取適量標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用甲醇稀釋定容，配置成濃度為0.1μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

(3) 內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液：由迪馬科技標(biāo)準(zhǔn)品部提供，濃度100μg/mL，溶于甲醇。(cat.#: 47972)

(4) 混合內(nèi)標(biāo)工作液：吸取適量內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，用甲醇稀釋定容，配置成濃度為0.1μg/mL的混合內(nèi)標(biāo)工作液。

三、提取:

四、凈化

ProElut^® PXC 60mg/3mL (Cat.#: 68203)

(1)活化：用2mL甲醇和2mL 0.1mol/L鹽酸溶液活化；

(2)上樣：備用液全部過柱，棄去流出液；

(3)淋洗：依次用2mL 0.1mol/L鹽酸溶液，1mL甲醇和1mL 2% 氨水*淋洗，推干，棄去流出液；

(4)洗脫：加入2mL 洗脫液**洗脫，并收集洗脫液；

(5)重新溶解：將洗脫液在35℃水浴下氮吹近干(剩余大約0.2mL)，用水定容至0.5mL，混勻，過Nylon膜(Cat.#: 37177)，上機(jī)分析。

*2% 氨水溶液：取2mL氨水，加水稀釋至100mL，混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配；

**洗脫液：取80mL甲醇，加水15mL、氨水5mL，混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配。

五、基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

取經(jīng)提取和凈化的空白試料溶液，加入適量混合標(biāo)準(zhǔn)工作液和100μL混合內(nèi)標(biāo)工作液，35℃水浴下氮吹近干(剩余大約0.2mL)，用水定容至0.5mL，混勻，過Nylon膜(Cat.#: 37177)，上機(jī)分析。

六、分析條件

UPLC 條件

色譜柱：Endeavorsil^® C18, 50×2.1mm,  1.8μm (Cat.#: 87002)

流速：0.3mL/min

進(jìn)樣量：10μL

柱溫：35℃

流動(dòng)相：A:0.1%甲酸水  B:0.1%甲酸乙腈

質(zhì)譜條件

電離模式：ESI

掃描方式：正離子掃描

檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測

電噴霧電壓：5500V

霧化氣壓力：50psi

輔助氣壓力：50psi

氣簾氣壓力：20psi

離子源溫度：500℃

定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

七、添加回收結(jié)果

八、目標(biāo)化合物的XIC圖

九、相關(guān)產(chǎn)品信息